大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞
大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞在維持角膜的透明性、結(jié)構(gòu)完整性及正常生理功能方面發(fā)揮著極為關(guān)鍵的作用。這些細(xì)胞主要位于角膜基質(zhì)層,占角膜厚度的約 90% 。從細(xì)胞形態(tài)來(lái)看,它們呈現(xiàn)出不規(guī)則的星狀或紡錘狀,具有多個(gè)細(xì)胞突起,借此與周圍細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)相互連接。
角膜基質(zhì)細(xì)胞的特性鮮明。在正常狀態(tài)下,其代謝活動(dòng)相對(duì)穩(wěn)定,主要負(fù)責(zé)合成和維持角膜基質(zhì)中的細(xì)胞外基質(zhì)成分,如膠原蛋白、蛋白多糖等。其中,規(guī)則排列的膠原蛋白纖維是保證角膜透明性的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),而蛋白多糖則對(duì)維持角膜水分平衡及機(jī)械強(qiáng)度至關(guān)重要。此外,當(dāng)角膜受到損傷或處于病理狀態(tài)時(shí),角膜基質(zhì)細(xì)胞能夠迅速感知并發(fā)生表型轉(zhuǎn)化。它們會(huì)從相對(duì)靜止的狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榛钴S的成纖維細(xì)胞樣表型,增殖能力增強(qiáng),同時(shí)合成和分泌更多的細(xì)胞外基質(zhì)成分,啟動(dòng)角膜的修復(fù)過(guò)程。
獲取該細(xì)胞一般通過(guò)組織塊培養(yǎng)法或酶消化法。組織塊培養(yǎng)法是將分離出的大鼠角膜基質(zhì)組zhi剪成小塊,接種于培養(yǎng)瓶中,細(xì)胞會(huì)從組織塊邊緣逐漸遷移生長(zhǎng)出來(lái)。酶消化法則是利用胰蛋/白酶、膠原酶等將角膜基質(zhì)組織消化,使細(xì)胞分離,經(jīng)離心、洗滌后進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中,需使用含有多種營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,如添加胎牛血清、胰島素、表皮生長(zhǎng)因子等,為細(xì)胞生長(zhǎng)提供適宜環(huán)境。培養(yǎng)環(huán)境要求嚴(yán)格控制溫度在 37℃,濕度飽和,氣體環(huán)境為 5% 二氧化碳和 95% 空氣。
在角膜生理功能方面,角膜基質(zhì)細(xì)胞通過(guò)持續(xù)更新和維護(hù)細(xì)胞外基質(zhì),保持角膜的透明性和機(jī)械強(qiáng)度,確保光線能夠順利透過(guò)角膜進(jìn)入眼內(nèi),為清晰的視覺(jué)奠定基礎(chǔ)。在角膜損傷修復(fù)中,轉(zhuǎn)化后的角膜基質(zhì)細(xì)胞能夠增殖并遷移至損傷部位,合成新的細(xì)胞外基質(zhì),填補(bǔ)損傷區(qū)域,促進(jìn)角膜傷口的愈合。然而,若修復(fù)過(guò)程異常,可能導(dǎo)致角膜瘢痕形成,影響角膜的透明性和視力。